槲皮苷

中文名称:槲皮苷

中文别名:榭黄甙;槲皮甙;栎素;橡皮甙

英文名称:quercetin-3-rhamnoside

英文别名:C.I. 75720; Quercitrin; 2-(3,4-dihydroxyphenyl)-5,7-dihydroxy-4-oxo-4H-chromen-3-yl 6-deoxy-alpha-L-mannopyranoside; 2-(3,4-dihydroxyphenyl)-5,7-dihydroxy-4-oxo-4H-chromen-3-yl 6-deoxyhexopyranoside; 2-(3,4-dihydroxyphenyl)-5,7-dihydroxy-4-oxo-4H-chromen-3-yl 6-deoxy-alpha-L-galactopyranoside; 2-(3,4-dihydroxyphenyl)-5,7-dihydroxy-4-oxo-4H-chromen-3-yl (5xi)-6-deoxy-alpha-L-lyxo-hexopyranoside

CAS:522-12-3

EINECS:208-322-5

分子式:C21H20O11

分子量:448.3769

槲皮苷作对照品测定总黄酮的含量

香柏 6切口Pingii vat．Wilsonii)为柏科圆柏属植物，主要用于园林装饰，其叶中较多的挥发油用作香精的原料．柏科圆柏属植物中主要含有：挥发油【1， 、黄酮【 '4】、萜类【5-6】等成分．柏科圆柏属植物的根、茎、叶、枝均可入药，具有重要的经济和药用价值．马明芳等对香柏水提取物进行了系统的研究【7】，从中分离纯化出13个化合物，其中双黄酮2个，5个黄酮；初步的HPLC分析结果表明槲皮苷含量较大．该属植物中的总黄酮具有清除 DPPH 自由基活性能力【4】．香柏总黄酮成品在抗炎、解热、镇痛、抗流感病毒、抗肝炎病毒、抗包括HIV在内的反转录病毒，以及降压、降脂、抗血栓等方面可获得广泛的应用【8J．但对其总黄酮的含量测定目前国内外均未见报道．为了促进该种植物的开发应用，本文报道了香柏总黄酮含量测定方法，为香柏总黄酮的含量测定提供科学依据．

1 实验材料 　　香柏样品于2008年8月采自四川小金县，经本实验室鉴定为柏科圆柏属植物香柏Sabina pingii(Cheng ex Ferre)1， wilsonii(Rehd．)Cheng et L．K．Fu．槲皮苷由本实验室从香柏中分离纯化，其结构经Ms，UV,IR， HNMR, CNMR等波谱进行表征，纯度经HPLC分析大于99．5%． 　　通用UV-1 90 1紫外分光光度计，METTLER AE24O电子天平，其余试剂均为国产分析纯． 　　2 实验方法及结果 　　2．1 对照品溶液的制备 　　精密称取在50~C下，真空干燥至恒重的槲皮苷标准品35．02mg，用无水乙醇溶解，定容至100ml，配制成浓度为0．35mg/ml的对照品溶液． 　　2．2 供试品的制备 　　精密称取lg干燥的香柏干粉，置于50ml圆底烧瓶中，加60%的乙醇溶液2Oral回流提取50rain，用布氏漏斗抽滤，旋转蒸发仪蒸干作为供试品，精密称重． 　　2_3 最大吸收峰的选择． 　　精密吸取槲皮苷标准液3ml，加入无水乙醇9ml，振摇溶解，置于50ml容量瓶中，静置5min，再加入5%的 NaNO2溶液2ml，振摇，静置6min，加入10%的AI(NO3)3溶液2ml，振摇，静置6min，最后加入5%的NaOH溶液20ml，振摇，静置1 5rain．用无水乙醇定容至刻度．以没加入檎{皮苷且按照上述相同方法配制的乙醇溶液为空白溶液．在200nm～700nm的波长范围内扫描，结果槲皮苷在270nm，355nm，505nm处均有最大吸收，空白溶液无干扰． 　　精密称取供试品浸膏2mg，加入无水乙醇1 0ml溶解，按上述方法操作．在255nm，325nm，500nm处均有较大吸收．精密称取供试品浸膏2mg，加入无水乙醇1 0ml溶解，不加NaNO2-A~(NO3)3．NaOH显色，定容至50ml，在200nm～700nm的波长范围内扫描，结果在22Ohm～400nm处有吸收，而在500nm左右没有吸收，因此选用 500nm作为检测波长．其光谱图见图1． 　　2．4 标准曲线的制备 　　分别精密量取0．0ml、2．0ml、3．0ml、4．0ml、5．0ml、6．0ml的槲皮苷标准品(0．35mg/m1)储备溶液，按照2．3 项下的操作方法进行操作．以第一瓶为空白液．在500nm波长处测定吸光度 值，以 值(y)为横坐标、槲皮苷的含量(x，mg/m1)为纵坐标作线性回归，得标准曲线：Y=1 2．923x．0．0048，，_=0．9994．结果表明槲皮苷浓度在 0．0 1 7mg/ml一0．040mg/ml之问呈线性关系，满足含量测定要求． 　　2．5 供试品显色稳定性实验 　　将2．2项下制备的供试品，按2_3项下的显色方法进行显色，在50Ohm波长下每隔5min测定其吸光度．结果见表1． 　　实验结果表明，供试品溶液在30min内显色稳定，满足含量测定要求． 　　2．6 重复性实验 　　精密称取1g干燥的香柏干粉，共5份，分别置于50ml圆底烧瓶中，加60%的乙醇溶液回流提取50min，用布氏漏斗抽滤后，旋转蒸发仪蒸干，50~C下真空干燥至恒重．称所得浸膏总重，然后从该总浸中精密称取供试品浸膏约2．00mg，加入无水乙醇1 0ml溶解，按2．3项下的方法操作，在500nm处测定吸光度．然后计算生药中总黄酮的含量．5份生药样品中黄酮含量的RSD为0．92%，结果见表2．实验结果表明，香柏中总黄酮的含量测定方法重现性好． 　　2．7 精密度实验 　　取2．5项下的同1份溶液按相同的方法在500nm波长下，测定5次吸光度值，其精密度的RSD为1．0%．试验结果表明该方法精密度满足含量测定要求． 　　2．8 加标回收实验 　　精密称1g干燥的香柏干粉，共5份，放入50ml圆底烧瓶中，将2．1项下配置的标准品溶液，量取10．00ml，放入100ml容量瓶中，定容至1 00ml，用移液管精密量取2．0m1分别加入前述圆底烧瓶中，(相当于加标准品0．07mg) 按2．2项下的方法制得供试品溶液，按2．4项下的显色方法显色，测定吸光度值．测得加标平均回收率为105．4%， RSD为0．25%． 　　3 讨论 　　槲皮苷是香柏中含量较多的一种黄酮类成分，其母核结构和吸收波长与芦丁基本一致，本实验采用 NaNO2一AI(NO3)3-NaOH方法显色，显色稳定，方法重现性好，准确度满足含量测定要求．选用500nm吸收波长，能较好的排除其他非黄酮类成分的干扰，较准确的反应提取物中总黄酮的含量．用上述含量测定方法测定三批香柏样品的总黄酮含量，分别为：4．14%，4．15%，4．14%．因此该方法可以作为香柏总黄酮含量的测定方法．