荧光猝灭

荧光猝灭

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定义

EB-DNA体系发射光谱图EB-DNA体系发射光谱图荧光淬灭(fluorescence quenching)是指荧光物质分子与溶剂分子之间所发生的导致:

①荧光强度变化

②相关的激发峰位变化

③荧光峰位变化

物理或化学作用过程。与荧光物质分子发生相互作用而引起荧光强度变化和相关的激发峰位和荧光峰位变化的物质被称为荧光淬灭剂(quencher)。

在光合作用的光反应中,电子受体即为荧光淬灭剂。[1]

分类

荧光淬灭分为静态淬灭和动态淬灭。

基态荧光分子与淬灭剂之间通过弱的结合生成复合物,且该复合物使荧光完全淬灭的现象称为静态淬灭。

激发态荧光分子与淬灭剂发生能量转移或物理碰撞使其荧光淬灭则称为动态淬灭。

方法

荧光分子本身浓度增大使其荧光猝灭的现象称为浓度猝灭或自猝灭。由于荧光的再吸收、荧光物质发生化学变化而观察不到荧光的现象一般不称为荧光猝灭。在利用荧光进行定量、液体闪击计数等包含荧光过程的测定方法中,一定要注意溶剂、共存杂质、氧气等猝灭剂的影响。

利用某种物质对某一种荧光物质的荧光猝灭作用而建立的对该猝灭剂的荧光测定方法,即为荧光猝灭法。一般而言,荧光猝灭法比直接荧光测定法更为灵敏,具有更高的选择性。

影响因素

分子结构和化学环境是影响物质发射荧光和荧光强度的重要因素. 至少具有一个芳环或具有多个共轭双键的有机化合物容易产生荧光,稠环化合物也会产生荧光.饱和的或只有一个双键的化合物,不呈现显著的荧光.最简单的杂环化合物,如吡啶,呋喃,噻吩和吡咯等,不产生荧光。

取代基的性质对荧光体的荧光特性和强度均有强烈影响.苯环上的取代基会引起最大吸收波长的位移及相应荧光峰的改变.通常给电子基团,如-NH2-,-OH,-OCH3,-NHCH3和-N(CH3)2等,使荧光增强;吸电子基团,如-CL,-Br,-I,-NHCOCH3,-NO2和-COOH,使荧光减弱.具有刚性结构的分子容易产生荧光。

大多数无机盐类金属离子不产生荧光,而某些情况下,金属螯合物却能产生很强的荧光. 溶剂的性质,体系的PH值和温度,都会影响荧光的强度.荧光分子与溶剂或其他分子之间相互作用,使荧光强度减弱的现象称为荧光猝灭.引起荧光强度降低的物质称为猝灭剂.当荧光物质浓度过大时,会产生自猝灭现象。

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