调节磷是一种新型有机磷植物生长调节剂、灌木防除剂和除草剂,它既可用于森林、草原、机场等四周作灌木防除剂,也可用于城市绿化、灌木化学修剪,还可用于植物开花、结实、着色、生长调节等方面,用途广泛。又因其极低的毒性、极佳的环境兼容性,适合于21世纪对农药品种发展的要求。
调节磷肌球蛋白轻链激酶(myosinlightchainkinase,MLCK)具有激酶和非激酶活性,在平滑肌收缩过程中起着关键酶调控的作用.为进一步阐明MLCK非激酶活性在平滑肌收缩过程中的调节作用,利用已删除部分激酶区域的MLCK重组体(pGEXF6.5)在大肠杆菌中进行表达,采用亲和层析技术纯化表达的MLCK片段,应用EnzChek磷分析试剂盒检测MLCK片段对磷酸化肌球蛋白、水解重酶解肌球蛋白(heavymeromyosin,HMM)及肌球蛋白亚片段1(subfragmentl,S1)ATP酶活性的影响,体外检测MLCK片段对肌动蛋白肌丝运动的调节.研究结果显示,pGEX-F6.5重组表达载体在大肠杆菌中以可溶性GST融合蛋白的形式表达.该融合蛋白经Glutathione-Sepharose4B纯化、SDS-PAGE鉴定得到较纯的单一表达条带.纯化的MLCK片段对磷酸化肌球蛋白、HMM和S1的ATP酶活性均有明显激活作用.MLCK片段激活磷酸化肌球蛋白ATP酶活性为:Vmax=(19.426±1.669)倍;Km=(0.486±0.106)μmol/L,MLCK片段对磷酸化HMM和S1的ATP酶活性也有相似的刺激作用.体外肌丝运动研究表明,随着MLCK片段浓度的增加,磷酸化肌球蛋白与肌动蛋白结合的数量不断增加,肌丝运动的速度也随之增加.上述结果表明,MLCK的C端非激酶活性具有调节磷酸化的肌球蛋白ATP酶活性及肌丝运动的作用.
调节磷是一种新型有机磷植物生长调节剂、灌木防除剂和除草剂,它既可用于森林、草原、机场等四周作灌木防除剂,也可用于城市绿化、灌木化学修剪,还可用于植物开花、结实、着色、生长调节等方面,用途广泛。又因其极低的毒性、极佳的环境兼容性,适合于21世纪对农药品种发展的要求。[1]