Taq聚合酶是一种耐热的 DNA聚合酶,由于发现于水生栖热菌(Thermus aquaticus)内,故命名为Taq聚合酶(Taq polymerase),也称为TaqDNA聚合酶,简称Taq酶或Taq。Taq聚合酶常见于 PCR技术,用于大量扩增DNA片段。
水生栖热菌是一种生长在温泉、蒸汽管道等处的细菌,它体内的Taq聚合酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,这在需要高温环境的PCR反应中有着重要意义。因此Taq聚合酶取代了之前常用于PCR反应的大肠埃希菌中的DNA聚合酶。PCR反应中应用Taq聚合酶,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷,大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。
一般适用于DNA片段的PCR扩增、 DNA标记、 引物延伸、 序列测定、 平末端加A等,产物可直接用于T-A 克隆载体。
Taq聚合酶在97.5°C时的半衰期为9分钟。它的最适温度为75-80°C,72°C时能在10秒内复制一段1000bp的DNA片段。这种较高的酶活性有明显的温度依赖性。低温下,TaqDNA聚合酶表现活性明显降低,90°C以上时合成DNA的能力有限。
Taq聚合酶的缺点之一为催化DNA合成时的相对低保真性。它缺乏3’→5’核酸外切酶的即时校正机制,出错率为1/9000。
1单位(U)Taq DNA 聚合酶活力定义为在74°C、30分钟内,以活性化的大马哈鱼精子DNA作为 模板/ 引物,将10nmol 脱氧核苷酸掺入到酸不容物质所需的酶量。
Taq聚合酶是我国台湾科学家钱嘉韵女士所分离,钱嘉韵是第一个报道分离耐高温DNA聚合酶工作的,1973 年,钱嘉韵就读于美国俄亥俄州 辛辛那提大学生物系,她的导师对黄石公园里热泉中发现的 嗜热菌十分好奇,就让钱嘉韵以该细菌作为研究主题。在另一位老师的指导下,钱学会了从细胞中分离蛋白质,成功分离出该细菌耐高温的TaqDNA聚合酶。