酶分子修饰

1、金属离子置换修饰：定义：通过改变酶分子中所含的金属离子，使酶的特性和功能发生改变的方法。常用于酶分子修饰的是二价金属离子，如：Ca2+，Mg2+，Mn2+，Zn2+，Co2+，Cu2+，Fe2+等。

2、大分子结合修饰：定义：利用水溶性大分子与酶结合，使酶的空间结构发生精细改变，从而改变酶的特性与功能的方法。常用修饰剂：右旋糖酐、聚乙二醇、肝素、蔗糖聚合物、聚氨基酸等。使用前一般需经过活化，然后在一定条件下与酶分子共价结合。

3、酶侧链水解修饰(肽链有限水解修饰)：定义：有些酶的肽链经有限水解，使酶的空间结构发生某些精细改变，从而改变酶的特性和功能的方法。酶蛋白主链修饰主要是靠酶切/酶原激活法。方法有：（1)加常用修饰剂：专一性较强的蛋白酶或肽酶；（2）其他：如EDTA+纯水或稀盐酸透析处理枯草杆菌中性蛋白酶，可使其部分水解。

4、酶分子的侧链基团修饰：定义：采用一定的方法（化学法）使酶蛋白的侧链基团发生改变，从而改变酶分子的特性和功能的修饰方法。组成蛋白质的氨基酸残基上的功能团，侧链基团改变引起酶蛋白空间构象的改变，从而改变酶的特性和功能。常见被修饰的基团有：羧基、氨基、巯基、咪唑基、酚羟基、胍基、色氨酸吲哚基

一般情况下，要求修饰剂具有较大分子量、有良好的水溶性和生物相容性，修饰后酶的半衰期长。

应熟悉酶的分子结构，活性部位，侧链集团。反应活性温度、PH等。

反应要在酶稳定的环境下进行，避免破坏酶的活性集团。控制酶分子与修饰剂的分子比例，反应温度，时长。确保酶的高结合率和高回收率。

酶的基因工程主要利用基因工程解决酶的大量生产和天然酶分子的改造。

在酶的蛋白质基础上利用基因工程将两种或两种以上的酶的不同结构片段构成新的酶，使酶具有多种生产需要的功能特点。