培养平板

时期 冷却凝固
外文名 cultureplate
类型 纯培养
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巧克力培养基

【用途】主要用于嗜血杆菌的分离,亦可用于奈瑟菌的增菌培养。  【原理】流感嗜血杆菌培养时,需要依赖血液中的X及V因子方能生长繁殖,当培养基加热至80~90℃时,可使血液中的红细胞破裂,以利于嗜血杆菌,奈瑟菌等的生长培养。凡疑有这些菌种存在的标本,均应接种巧克力平板。血液标本培养,增菌后又细菌生长,若移种巧克力平板上,有利于分离更多的细菌。  【成分】牛肉浸出液1L蛋白胨10氯化钠5琼脂15无菌脱纤维马血、羊血或兔血100mlpH7.2~7.4  【制备】将前四项成分混合,加热溶化,校对pH,高压灭菌(121℃15min)后在80~90℃以无菌方法加入血液,摇匀后置90℃水浴中。维持该温度15min,使之呈巧克力色取出,至室温冷至约50℃,倾制平板 。凝固后,抽样置于35℃培养18~24h,如无细菌生长,冷藏备用。  【接种】将可疑标本直接划线接种于该培养基上,置35℃普通培养或置含5%~10%二氧化碳环境培养18~24h,取出观察细菌生长状况。  【观察结果】流感嗜血杆菌菌落微小(0.8mm),无色透明、光滑整齐、似露滴状,48h后达1.5mm,从血液或脑脊液中分离的菌落往往形成液状,菌落较大,老培养物菌落中心呈凹陷。  【质量控制】流感嗜血杆菌ATCC10211,生长良好,菌落典型。肺炎链球菌,ATCC6305,生长良好,菌落典型。  【保存】置冰箱,1周内用完。

血琼脂培养基

【用途】适用于各类需氧及兼性厌氧细菌生长,一般细菌学检验标本的分离培养、溶血鉴别及菌种保存  【原理】羊血或兔血时细菌生长繁殖的良好营养物质。在45℃~50℃的基础培养基中加加入血液(5~10%)可以保存血液中某些不耐热的生长因子,同时血细胞不被破坏。若将NaCl的浓度提高到0.85%,则可使血平皿经35℃18~24h后色泽仍然鲜艳。在血平板上除可以观察菌落的形态外,还可以判断溶血的情况:菌落周围的培养基内红细胞完全破坏为溶血。菌落周围呈绿色为ɑ溶血。溶血的情况可以显微镜下用低倍镜观察  【成分】牛肉浸出液1L蛋白胨10氯化钠5琼脂15无菌脱纤维羊血60ml pH7.2~7.4  【制备】将前四项成分混合,加热溶化,校对pH,置三角瓶内,高压灭菌(121℃15min)后冷至约50℃ ,加入无菌纤维羊血,旋转式充分摇匀后倾平板。血琼脂层厚4mm。凝固后,抽样置于35℃培养18~24h,如无菌生长,冷藏备用。  【接种】取标本增菌培养物或纯培养物划线接种到平板上,置35℃培养1~2d,观察结果  【观察结果】在血平板上除可以观察菌落的形态外,还可以判断溶血的情况:菌落周围的培养基内红细胞完全被破坏为溶血,菌落周围呈绿色为ɑ  【质量控制】化脓性链球菌,ATCC19615,生长良好,-溶血。肺炎链球菌,ATCC6303,为ɑ溶血。表皮葡萄球菌,ATCC12228,生长良好,不溶血。

营养肉汤

【用途】用于一般细菌的增加培养,加入1%的琼脂粉亦可作营养琼脂。  【原理】该培养基含有氮及微量无机盐,适宜一般细菌的生长繁殖,因此是最基础的培养基。  【成分】牛肉浸液1L蛋白胨10氯化钠5pH7.2~7.4(牛肉浸液可用3.0g牛肉膏和1L蒸馏水代替)  【制备】上述各成分混合溶解,校正... [1]

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