细胞分裂指数

表示细胞增殖旺盛程度的指标。它以被测1000个细胞中的分裂细胞数来计算。^[1]

指测定细胞群中1000个细胞中分裂细胞所占的比率。（细胞工程）

细胞分裂指数=细胞分裂相数/细胞总数（1000）×100%^[1]

用秋水仙素将细胞处理1～2小时后，按染色体制片法制片并染色，计算1000个细胞中分裂相的数目，重复3-4次取平均值，用百分比表示。

秋水仙素能抑制有丝分裂，破坏纺锤体，使染色体停滞在分裂中期。^[1]

操作时动作要轻，以免使盖片上的细胞脱落。

观察时要掌握好分裂相标准，主要是确定划分间期和前期，末期和间期等的界限，以减少误差。^[1]

体外培养细胞生长、分裂繁殖的能力,可用分裂指数来表示.它与生长曲线有一定的联系,如随着分裂指数的不断提高,细胞也就进入了指数生长期.分裂指数指细胞群体中分裂细胞所占的百分比,它是测定细胞周期的一个重要指标,也是不同实验研究选择细胞的重要依据.

分裂指数测定可用盖片培养法，亦可直接在小平皿中进行。在计算分裂相时要掌握好分裂相标准，选择密度近似区观察计数。

一、原理

体外培养细胞生长、分裂繁殖的本领,可用分裂指数来显示.它与生长曲线有一定的联系,如跟着分裂指数的不断提高,细胞也就进入了指数生长期.

分裂指数指细胞群体中分裂细胞所占的百分比,它是测定细胞周期的一个主要指标,也是不同实验研究选择细胞的主要依据.

二、仪器、用品与试剂

1、仪器与用品：CO2培养箱、普通显微镜、细胞培养皿、盖玻片、吸管

2、试剂：培养液、胰酶、甲醇、冰醋酸、Giemsa染液

三、操作步骤

1、消化细胞,将细胞悬液接至内含盖玻片的培养皿中.

2、CO2培养箱中培养48小时,使细胞长在盖片上.

3、取出盖片,按下列顺序操作：

PBS漂洗3分钟→甲醇：冰醋酸=3：1固定液中固定30分钟→Giemsa液染色10分钟→自来水冲洗.

4、盖片晾干后反扣在载玻片上,镜检.

5、计算:

分裂指数=分裂细胞数/总细胞数×100%

四、注意事项

操作时动作要轻,以免使盖片上的细胞脱落.

附：Giemsa染液配制：

称Giemsa粉末0.5克,加几滴甘油研磨,再加入甘油（使加入的甘油总量为33ml）.56℃中保温90—120分钟.加入33ml甲醇,置棕色瓶中保存,此为Giemsa原液.

使用时按要求用PBS稀释.一般稀释10倍.