溴化乙锭

分子式：C21H20BrN3

英文名：Ethidium bromide

英文别名：Ethidium bromide solution; 3,8-Diamino-5-ethyl-6-phenylphenanthridinium bromide~Homidium bromide; Homidium bromide; Ethidium?bromide

分子量： 394.3139 g/mol

熔点：260 - 262 °C

为芳香族荧光化合物

EB（Ethidium bromide，溴化乙锭）^[1]

由于溴化乙锭具有一定的毒性，实验结束后，应对含EB的溶液进行净化处理再行弃置，以避免污染环境和危害人体健康。

(1) 对于EB含量大于0.5mg/ml的溶液，可如下处理：

①将EB溶液用水稀释至浓度低于0.5mg/ml；

②加入一倍体积的0.5mol/L KMnO4，混匀，再加入等量的25mol/L HCl，混匀，置室温数小时；

③加入一倍体积的2.5mol/L NaOH，混匀并废弃。

(2) EB含量小于0.5mg/ml的溶液可如下处理：

① 按1mg/ml的量加入活性炭，不时轻摇混匀，室温放置1小时；

② 用滤纸过滤并将活性碳与滤纸密封后丢弃。

*EB=溴化乙锭

观察琼脂糖凝胶中DNA最常用的方法是利用荧光染料溴化乙锭进行染色，溴化乙锭含有一个可以嵌入DNA堆积碱基之间的一个三环平面基团，它与DNA的结合几乎没有碱基序列特异性。在高离子强度的饱和溶液中，大约每2.5个碱基插入一个溴化乙锭分子。当染料分子插入后，其平面基团与螺旋的轴线垂直并通过范德华力与上下碱基相互作用。这个基团的固定位置及其与碱基的密切接近，导致与DNA结合的染料呈现荧光，其荧光产率比游离溶液中染料有所增加。DNA吸收254nm处的紫外辐射并传递给染料，而被结合的染料本身吸收302nm和366nm的光辐射。这两种情况下，被吸收的能量在可见光谱红橙区的590nm处重新发射出来。由于溴化乙锭-DNA复合物的荧光产率比没有结合DNA的染料高出20-30倍，所以当凝胶中含有游离的溴化乙锭（0.5ug/ml）时，可以检测到少至10ng的DNA条带。

由于在该染料存在的情况下，线状DNA的电泳迁移率约降低15%，因此，当需要知道DNA片段的准确大小（如DNA限制酶酶切图谱的鉴定）时，凝胶应该在无EB情况下电泳，电泳结束后用EB染色。染色完毕后，通常不需要脱色。但是在检测小量DNA（小于10ng）片段时，通常要将染色后的凝胶进行脱色。

溴化乙锭可以用来检测单链或双链核酸（DNA或RNA）。但是染料对单链核酸的亲和力相对较小，所以其荧光产率也相对较低。事实上，大多数对单链DNA或RNA染色的荧光时通过染料结合到分子内形成较短的链内螺旋产生的。

切勿吸入粉尘。

不慎与眼睛接触后，请立即用大量清水冲洗并征求医生意见。

穿戴适当的防护服、手套和护目镜或面具。

若发生事故或感不适，立即就医(可能的话，出示其标签)。

皮肤接触及吞食有害。

吸入有极高毒性。

刺激眼睛、呼吸系统和皮肤。

可能有不可逆后果的危险。

溴化乙锭可以嵌入碱基分子中,导致错配。许多人认为溴化乙锭是强诱变剂,具有高致癌性。

实际上到2013年6月6日前还不能证明溴化乙锭是基因致癌物。^[2]还没有任何证据能证明直接接触EB（溴化乙锭）能对任何动物有毒害性。人们认为EB有致癌性仅仅是因为试管培养细胞时，EB能够抑制细胞生长，但是多年前有研究者将EB直接经皮下或肌肉注射到家畜上，该实验并没有说明EB能够提高家畜的致癌率。所以说，EB并没有人们想象的那么可怕。^[3]

虽然溴化乙锭可以嵌入碱基分子中，导致错配。但是溴化乙锭并不能通过皮肤进入细胞内。所以说溴化乙锭相对其他的致癌物质还是比较安全的。