吖啶橙

简称：AO

AO能与无机酸形成盐，具有绿色荧光。如果再稀释的话，便水解成游离的AO，而呈现紫色荧光。

吖啶橙/溴化乙锭双荧光染色测定PC12细胞凋亡（acridine orange/ethidium bromide, AO/EB）：

（1）细胞爬片：在6孔培养板中预先置入玻璃盖玻片，接种细胞悬液，干预后，予95%乙醇固定15分钟，微干，然后准备荧光染色。将100mg/L溶于PBS的吖啶橙和100mg/L溶于PBS的溴化乙锭各5μl（临用前混合加入，加样量宜小，有时各2μl-5μl足够，量太大容易形成细胞凋亡的假阳性），在照相前混匀后加入，轻轻吹打，30秒后用激光共聚焦显微镜观察照相。（有人用15mg吖啶橙溶于100ml pH6.8的PBS中过滤，避光保存）计取5个视野，共100个细胞中凋亡细胞百分数。

（2）如制成细胞悬液：取100μl PBS稀释的细胞悬液，加2μl的染色液，其中AO/EB，各含100μg/ml，加入染料30秒后观察摄像。

用作荧光指示剂，肿瘤细胞及细菌、核酸染色剂及移码突变的诱变剂。

吖啶橙是一种荧光色素，吖啶橙激发滤光片波长488nm。阻断滤光片波长515nm。吖啶橙与细胞中DNA和RNA结合量存在差别，可发出不同颜色的荧光（即着色特异性），这是由于DNA是个高度聚合物，吸收荧光物质的位置较少，发绿色荧光，而RNA聚合度低，能和荧光物质结合的位置多，故发红色荧光。

项目　电泳级

λmax., 50 % EtOH: 　 490 - 495 nm

E 1 %/1 cm, λmax.: 　> 1200 (EtOH 50 %)

干燥损失Loss on drying: 　≤ 5 %

pH (1 %; H2O): 　约4.0 (20°C)

品级Grade 分子生物学级,≥80.0%

(for molecular biology，Dye Content ≥80.0%（HPLC))

外观Appearance Red to Brown Powder

红外光谱Infrared spectrum Conforms to Structure

水溶性Solubility c = 1mg/ml; Water，Dark Orange to Amber， Clear

氮Nitrogen 8.5- 12.5 %

染料含量Dye Content (HPLC) ≥80.0%

橙色粉末。溶于水、乙醇。溶液为橙黄色带绿色荧光。pH值为8.4～10.4则无荧光。能镶嵌于两个相邻的碱基对之间，使部分双螺旋DNA松开，该两个碱 基对的距离拉大一倍。这样的DNA复制过程中，会使DNA链增加或缺失一个碱基，造成移码突变。

熔点:165℃

相对密度:-

溶解性:soluble