放射免疫技术

目录

一,原理及分类

二,常用的放射性核素

三,标记物制备及鉴定

四,抗血清鉴定

第二节放射免疫分析

一,基本原理

二,实验方法及测定

第三节免疫放射分析

一,基本原理

二,IRMA与RIA的比较

思考题

小结

免疫技术:以抗原-抗体反应原理为基础,对样品中相应抗原或抗体进行检测.

标记技术:将可被探测的示踪物质用化学方法与化合物连接.

标记免疫分析:用可微量或超微量检测的示踪剂标记抗原,抗体,检测免疫反应结果并确定待检物.

标记免疫技术-基本概念

常见标记免疫技术

放射免疫技术

酶免疫技术

荧光免疫技术

第一节放射免疫技术

稍后又发展了非竞争性结合的免疫放射分析(IRMA).该类技术具有灵敏度高,特异性强,重复性好,样品及试剂用量少,操作简便且易于标准化等优点,广泛应用于生物医学研究和临床诊断领域中各种微量蛋白质,激素,小分子药物和肿瘤标志物的定量分析,对相关学科的发展起到了极大地推动作用.

放射免疫

RIA

以标记抗原与反

应系统中未标记

抗原竞争结合特

异性抗体来测定

待检样品中抗原

量.

免疫放射

IRMA

以过量标记抗体

与抗原非竞争结

合,采用固相免

疫吸附载体分离

游离和结合标记

抗体.

放射受体分析

RRA

放射配体结合

分析RBA

其它

一,放射免疫技术-原理及分类

二,放射免疫技术-常用的放射性核素

125I3H

射线γβ

理化性活泼差

核素丰度>90%-

半衰期60.2d12.3y

标记方法简单复杂

标记设备低廉昂贵

测量条件简单复杂

常用标记核素

125碘-标记物的制备-标记

125I-

化学或酶促反应,将

放射性负电碘离子氧

化成碘原子或正电碘

离子,通过取代反应

置换被标记物分子中

酪氨酸或酪胺残基以

及组胺残基上的氢原

子.

125I或125I+

125I-标记物

(混合物)

Ch-T,LPO氧化

取代反应

直接标记法

三,放射免疫技术-标记物制备及鉴定

使用无还原剂的高比放射性碘源

被标记物用量要少

ch-T用量要低

控制总反应体积