热解糖梭菌
1.热解糖梭菌的检验
增菌 取变质罐头内容物2g分别热接种PE-2培养基和改良PE-2培养基(绿豆代替豌豆),加蜡,速冷,置55℃
厌氧培养72h,结果培养管内液体均混浊,变黄色且产气。两种培养基内变化无差别。
分离 取增菌液分别接种PE-2琼脂培养基与改良PE-2琼脂培养基,55℃厌氧培养48h,菌落均为灰白色,偏平,边缘不整齐,表面有光泽,中心稍凸,直径1~2mm,涂片染色为革兰阳性端生芽胞梭菌。两种培养基上菌落特性相同。
生化反应 取分离菌种分别接种到0.5%糖类培养基及其它生化培养基,55℃厌氧培养72h。结果显示,该菌能分解葡萄糖、乳糖、麦芽糖、
甘露糖、蔗糖、
半乳糖、果糖、
木胶糖、阿拉伯糖、
棉子糖、纤维二糖、水杨苷、淀粉产酸并产气,不能分解蛋白质、甘露醇、山梨醇、卫矛醇、肌醇、甘油、尿素,卵磷脂酶、硫化氢、硝酸盐还原、明胶液化呈阴性反应,在2%NaCI、4%NaCI中不能生长,在10%葡萄糖中能生长,但不能在15%葡萄糖中生长。
在不同pH环境中生长情况 取分离菌种分别接种不同pH的PE-2培养液与改良PE-2培养液,55℃厌氧培养72h,结果其生长范围为pH4.0~8.5,最佳生长pH为6.0~7.0。与文献报道相同。
在不同温度条件下生长情况 取分离菌种分别接种PE-2培养液和改良PE-2培养液,放不同温度下厌氧培养观察7d,结果37℃以下不生长,37~45℃微弱生长,55~60℃生长最好。
在不同培养基内的生长情况 将菌种分别接种于几种不同的培养基。55℃厌氧培养72h,结果在含水量0.1%硫
乙醇酸钠的卵黄琼酯、改良PE-2琼脂、亚硫酸钠葡萄糖琼脂、庖肉培养基、PYG培养液中生长良好, 但在亚硫酸钠琼脂内不生长。
动物实验 选体重为1.5kg健康兔子2只,取该菌72h培养液(55℃厌氧)给予灌胃,每只20ml,观察7d,未见不良反应。将培养液离心,取上清液进行小白鼠(18~20g)腹腔注射,每只0.5ml,共4只,观察7d未见异常反应。
2.产气性变质通常是指罐听发生膨胀的变质而言,这种变质系由专性嗜热的产芽孢
厌氧菌—嗜热解糖梭菌所引起。实验显示,该菌是专性厌氧菌,最适生长温度为55℃。其分解糖的能力很强,能分解葡萄糖、乳糖、蔗糖、水杨苷及淀粉等多种糖类而产酸和大量气体,不分解蛋白质、不能使硝酸盐还原、不产生毒素,也不能引起感染。但是它具有酸败性,如芽孢先在较高温度(50~55℃)下发芽,则37℃14d就可产生酸败,使内容物常常带有酪酸臭味或干酪样臭味。其最适pH是6.0~7.0,有时能在pH为4.1到4.5的番茄产品中发生酸败,而低于pH4.0以下的罐头食品的酸败与嗜热厌氧菌是无关的。
3.热解糖梭菌广泛分布于外界环境中,可通过水体、土壤,农副产品等污染罐头食品,已经发现辅料如糖、奶粉、淀粉、谷类以及营养糊是嗜热厌氧菌的主要来源。国外报道在生原料如蘑菇和洋葱的产品中曾发现该菌。在罐头加工过程中,若杀菌不彻底,再加上加工后不能立即冷却,产品温度较长时间保持在45~65℃之间,残留的芽孢即可发芽、生长繁殖。尤其罐头中多含有淀粉等含糖辅料,造成罐头食品发生酸败变质。所以,在罐头加工过程中应严格进行杀菌,杀菌后切忌堆放,应立即通风冷却,将罐头中心温度立即有效地冷却到43℃以下, 并将罐头远离热源在低于35℃的地方储存,这样嗜热厌氧菌的存在就不重要了,从而保证达到商业无菌,减少罐头食品变质,避免经济损失。
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