麦芽糖酶

　　原来是对可使 麦芽糖水解生成2分子葡萄糖的酶所用的名称，但现在一般地是作为作用于结合各种配糖基的α-D-葡萄糖苷的α-葡萄糖苷酶的别名来使用。它可以从 低聚糖类底物的非 还原性末端切开α-1，4糖苷键，释放出葡萄糖，或将游离出的葡萄糖残基以α-1，6糖苷键转移到另一个底物上，从而得到非发酵性的 低聚异麦芽糖(IMO)、糖脂或糖肽等。α-葡萄糖苷酶在淀粉加工工业中可以用作糖化 酶制剂，与 α-淀粉酶一起生产高 葡萄糖浆。另外，α-葡萄糖苷酶作为工业化生产IMO的关键酶制剂备受国内外食品工业界的重视。目前，工业生产中使用的α-葡萄糖苷酶主要来源于 黑曲霉(Aspergillusniger)。 对一株分离自 深海热液口的 超嗜热 古菌(ThermococcussiculiHJ21)菌株进行了产α-葡萄糖苷酶条件的优化和 酶学性质的初步研究。胞内发酵时间为6h，胞外发酵时间为21h时，较适合产α-葡萄糖苷酶；其最适产酶温度为85℃，pH为6.5，NaCl浓度为2.5%； 可溶性淀粉、 酵母粉和 蛋白胨促进产酶。该α-葡萄糖苷酶的最适 作用温度为100℃，90℃半衰期为2h；最适酶作用pH值为7.0，在pH为5.0～8.0之间 酶活力相对稳定；该酶 热稳定性不依赖Ca2+，且Ca2+对该酶有抑制作用， 金属离子Cu2+、Al3+、Ni2+对该酶有较明显抑制作用，Hg2+强烈抑制该酶的活性，而EDTA、Fe3+和K+对该酶有激活作用。 以T.siculiHJ21染色体DNA为模板，采用 PCR技术，成功克隆了T.siculiHJ21的α-葡萄糖苷酶基因。 基因序列结果显示，该基因 开放阅读框大小为729bp，编码的蛋白质分子含有242个 氨基酸残基，分子量约27.2kDa。同 Genbank数据库中已公开的α-葡萄糖苷酶基因序列进行 同源性比对分析结果表明，T.siculiHJ21的α-葡萄糖苷酶的基因序列与Thermococcushydrothermalis的α-葡萄糖苷酶亲缘关系最近，同源性达到81%，氨基酸同源性达90%。