运载体

在基因操作过程中使用运载体有两个目的：

一是用它作为运载工具，将 目的基因转移到宿主细胞中去； 二是利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量的复制（称为克隆）。

常用的运载体主要有两类：

一类是细菌细胞质的 质粒，它是一种相对分子质量较小、独立于染色体DNA之外的环状DNA(一般有1～200 kb左右，kb为千碱基对)，有的一个细菌中有一个，有的一个细菌中有多个。质粒能通过细菌间的接合由一个细菌向另一个细菌转移，可以独立复制，也可整合到细菌染色体DNA中，随着染色体DNA的复制而复制。

另一类运载体是噬菌体或某些病毒等。

除以上两类外，人们还在不断寻找新的运载体，如叶绿体或线粒体DNA等也有可能成为运载体。

作为运载体必须具有四个条件：

①在宿主细胞中能保存下来并能大量复制；

②有多个限制酶切点，而且每种酶的切点最好只有一个，如 大肠杆菌pBR322就有多种限制酶的单一识别位点，可适于多种限制酶切割的DNA插入；

③有一定的标记基因，便于进行筛选。如大肠杆菌的pBR322质粒携带氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因，就可以作为筛选的标记基因。

④对受体细胞无害。

一般来说，天然运载体往往不能满足上述要求，因此需要根据不同的目的和需要，对运载体进行人工改建。现今实际所使用的质粒载体几乎都是经过改建的。