酶联合吸附测定

待检血清与已知阴性血清的比值（P/N）<2.1，而且待检血清的OD值<0.4，则判为阴性。

异常结果：待检血清与已知阴性血清的比值（P/N）≥2.1，而且待检血清的OD值≥0.4，则判为阳性。

需要检查人群：检测抗原抗体。

检查前禁忌：准备好各种包装液，并配置好浓度。

检查时禁忌：

1.严格控制影响标记效率的因素如温度、时间、pH、酶和抗体量等。

2.装层析柱时要使柱体均匀、柱面平整，无气泡、裂隙。

常用的 ELISA 法有双抗体夹心法和间接法，前者用于检测大分子抗原，后者用于测定特异抗体。

1.间接ELISA

本法主要用于检测抗体。间接ELISA的操作程序如下。

（1） 材料

① 包被液、洗涤液、保温液、底物液、终止液。

② DVH包被抗原、酶标抗抗体、阴性及阳性DVH参考血清。

③ ELISA检测仪、加样器、聚苯乙烯微量板。

（2） 方法步骤

① 加抗原包被 → 4℃过夜，洗涤三次、抛干。

② 加待检血清 → 37℃ 2小时，洗涤三次、抛干。

③ 加酶标抗体 → 37℃ 2小时，洗涤三次、抛干。

④ 加底物液　→ 37℃ 30分钟，加终止液。

⑤ 用ELISA检测仪测定OD值，并计算出P/N比值。

2.双抗体夹心ELISA

本法主要用于检测大分子抗原。

① 加抗体包被 → 4℃过夜，洗涤三次、抛干。

② 加待检抗原 → 37℃ 30分钟，洗涤三次、抛干。

③ 加酶标抗体 → 37℃ 30分钟，洗涤三次、抛干。

④ 加底物液　→ 37℃ 15分钟，加终止液。

⑤ 用ELISA检测仪测定OD值。

不适宜人群：无。

无相关并发症和危害。^[1]